人体肾脏慢性移植功能性障碍中具有平滑肌样细胞特征的CD16 +的减少-技术前沿-资讯-生物在线

人体肾脏慢性移植功能性障碍中具有平滑肌样细胞特征的CD16 +的减少

作者:TG亚太公司 2022-11-01T11:02 (访问量:6650)

目前世界有着诸多关于肾脏慢性移功能障碍(CTD)与持续性的免疫炎症最终导致组织重塑包括肝内动脉新内膜形成。研究表明,受体来源的α-SMA +平滑肌细胞存在于异源移植肾脏CTD。含有骨髓细胞PBMC外周血单个核细胞)在体外α-SMA +具有分化能力,但是原始细胞的表型是未知的。

本研究旨在发现包含细胞与平滑肌样细胞单细胞亚群分化能力,是肾移植受体CTD单核细胞亚群会发生变化。实验中CD14、CD16的表达为基础分选健康对照组单核细胞亚群,研究骨髓间质标记α-SMA和SM22α基因表达水平。

CD14+/CD16++显示对比增加α-SMA和SM22αmRNA表达水平与CD14++/ CD16-得到增加的分化潜能接近于平滑肌细胞。流式细胞仪结果显示非CTD移植患者CD14+ /CD16 ++比例减少,而且CTD患者的减少比例更高为了确定CD14+/CD16 ++单核细胞和体外α-SMA +细胞生长潜力之间的关联,健康对照组CTD移植受体,非CTD移植受体的PBMC在指定条件下培养,最终定其显著相关性(P = 0.0002,r= 0.62)。双染色α-SMA和CD16显示CTD患者肾脏移植中α-SMA + CD16 +细胞的存在,即使数量很低

数据结果表明,相比于CD14++CD16,平滑肌细胞相关基因CD14+CD16++表达增加。CTD肾移植患者单核细胞亚群减少,可能是由于移植中的选择性迁移的结果

在对细胞的定量分析与α-SMA的表达表现测定时,利用奥地利TissueGnostics公司Tissue FAXS显微镜成像系统,TissueQuest软件分析系统。


图像获取部分:

Fig.5,肾脏移植中荧光染色的CD16与α-SMA的联合表达。(A)人体脾脏中CD16/CD68, CD68/α-SMACD16/α-SMA的双重荧光标记。其中(B) CD16/CD68, (C) CD16/CD68 , (D) CD16/α-SMA。每项中上行non-Tx代表非移植人类肾脏,下行IF/TA代表肾脏移植。(D)中箭头指向圈出区域CD16+α-SMA+双阳性细胞。


Fig 3 肾脏移植受体和健康对照组中单细胞亚群特征。(A)散点图中对细胞进行正向回溯。得到细胞亚群的数量(1)总活细胞数量(2)单细胞数(3)淋巴细胞(B)健康对照组,CTD肾脏移植受体和非CTD肾脏移植受体中活细胞CD14+频率。(C)PBMC中CD14和CD16表达类型。区域2中的数据。(D)健康对照组与肾脏移植受体的单细胞亚群的频率。


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